Shigatoxigenic Escherichia coli (STEC) is a foodborne pathogen that causes hemolytic uremic syndrome (HUS) and the consumption of chicken products has been related to some HUS cases. We performed a non-selective isolation and characterization of STEC strains from retail chicken products. STEC isolates were characterized according to the presence of stx1, stx2, eae, saa and ehxA; stx subtypes and serotypes. Most of them carried stx2, showing subtypes associated with severe human disease. Although reported in other avian species, the stx2f subtype was not detected. The isolates corresponded to different serotypes and some of them, such as O22:H8, O113:H21, O130:H11, O171:H2 and O178:H19, have also been identified among STEC isolated from patients suffering from diarrhea, hemorrhagic colitis, HUS, as well as from cattle. Considering the virulence profiles and serotypes identified, our results indicate that raw chicken products, especially hamburgers sold at butcheries, can be vehicles for high-risk STEC strains.

Escherichia coli productor de toxina de Shiga (STEC) es un patógeno transmitido por alimentos que causa el síndrome urémico hemolítico (SUH). Algunos casos de SUH están relacionados con el consumo de productos de pollo. Se realizó el aislamiento no selectivo y la caracterización de cepas STEC provenientes de productos de pollo atendiendo a la presencia de stx1, stx2, eae, saa y ehxA, subtipos de stx y serotipos. La mayoría de los aislamientos portaba stx2 y subtipos de stx asociados con enfermedades graves en humanos. Aunque se ha detectado en otras especies aviares, el subtipo stx2f no se encontró. Se detectaron diferentes serotipos, entre ellos O22:H8, O113:H21, O130:H11, O171:H2 y O178:H19, también identificados como STEC aislados de pacientes con diarrea, colitis hemorrágica y SUH, y de ganado bovino. Teniendo en cuenta los perfiles de virulencia y los serotipos identificados, nuestros resultados indican que los productos de pollo crudos, especialmente las hamburguesas que se venden en las carnicerías, pueden ser vehículos de cepas STEC de alto riesgo.

In Argentina, EPEC is one of the most prevalent agents isolated from children with diarrhea. Because contamination with this pathotype could occur during slaughter, the aim of this study was to isolate and characterize EPEC strains obtained from live animals (cloacae), eviscerated carcasses, washed carcasses and water from chillers. Twenty nine isolates of atypical EPEC were characterized. These isolates presented a wide variety of serotypes, some of which (O2:H40, O8:H19 and O108:H9) had been reported in other animal species. Serotype O45:H8, previously isolated from children with diarrhea was also found. Isolates of serotypes O2:H40, O108:H9 and O123:H32 were detected at different stages of the slaughtering process, suggesting that the process is not adequately performed. This latter fact highlights the importance of reinforcing control and hygienic measures at different stages of the chicken slaughtering process in order to reduce microbial contamination.

En Argentina, Escherichia coli enteropatogénico (EPEC) es uno de los agentes más prevalentes aislados de niños con diarrea. Debido a que la contaminación con este patotipo en productos de pollo podría ocurrir durante el proceso de faena, nos planteamos como objetivo aislar y caracterizar EPEC de muestras de animales vivos (cloacas), carcasas evisceradas sin lavar, carcasas lavadas y agua del tanque de enfriamiento. Se caracterizaron 29 aislamientos de EPEC que presentaron una amplia variedad de serotipos, algunos de los cuales (O2:H40, O8:H19 y O108:H9) han sido informados en otras especies animales. También se encontró el serotipo O45:H8, aislado con anterioridad de niños con diarrea. Se detectaron aislamientos de los serotipos O2:H40, O108:H9 y O123:H32 en distintas etapas del proceso de faena, lo que sugiere que el procesamiento no se realiza en forma adecuada. Se torna necesario reforzar las medidas de control e higiene en las distintas etapas del proceso para disminuir la contaminación microbiana.

A total of 153 Shiga-toxin-producing Escherichia coli (STEC) isolates from feces of cattle and beef products (hamburgers and ground beef) in Argentina were characterized in this study. PCR showed that 22 (14%) isolates carried stx1 genes, 113 (74%) possessed stx2 genes and 18 (12%) both stx1 and stx2. Intimin (eae), enterohemolysin (ehxA), and STEC autoagglutinating adhesin (saa) virulence genes were detected in 36 (24%), 70 (46%) and in 34 (22%) of the isolates, respectively. None of 34 saa-positive isolates carried the gene eae, and 31 were ehxA-positive. Fourteen (7 of serotype O26:H11 and 4 of serotype O5:H-) isolates had intimin b1, 16 isolates possessed intimin g1 (11 of serotype O145:H- and 5 of serotype O157:H7), 5 isolates had intimin type ε1 (4 of serotypes O103:H- and O103:H2), and one isolate O111:H- showed intimin type θ/g2. Although the 153 STEC isolates belonged to 63 different seropathotypes, only 12 accounted for 58% of isolates. Seropathotype ONT:H- stx2 (18 isolates) was the most common, followed by O171:H2 stx2 (12 isolates), etc. The majority (84%) of STEC isolates belonged to serotypes previously found in human STEC and 56% to serotypes associated with STEC isolated from patients with hemolytic uremic syndrome (HUS). Thus, this study confirms that cattle are a major reservoir of STEC pathogenic for humans. To our knowledge, this is the first study that described the presence of saa gene in STEC of serotypes O20:H19, O39:H49, O74:H28, O79:H19, O116:H21, O120:H19, O141:H7, O141:H8, O174:H21, and ONT:H21. The serotypes O120:H19 and O185:H7 were not previously reported in bovine STEC.

Neste estudo, um total de 153 Escherichia coli produtoras de toxinas Shiga (STEC) isoladas de fezes de gado bovino e de carne moida e hamburgues de carne bovina na Argentina foram caracterizados. Os ensaios de PCR mostraram que 22 (14%) dos isolados possuiam o gene stx1, 113 (74%) o gene stx2 e que 18 (12%) tinham ambos os genes. Os genes de virulência para a intimina (eae), a enterohemolisina (ehxA) e a adesina autoaglutinante de STEC (saa) foram detectados em 36 (24%), 70 (46%) e 34 (22%) dos isolados, respectivamente. Nenhum dos 34 isolados saa-positivos tinham o gene eae, no entanto 31 eram ehxA-positivos. Catorze isolados (7 do serótipo O 26:H11 e 4 do serótipo O5:H-) tinham a intimina b1, 16 possuiam a intimina g1 (11 do serótipo O145:H- e 5 do serótipo O157:H7), 5 isolados foram positivos para a intimina tipo ε1 (4 dos serótipos O103:H- e O103:H2), e um isolado O111:H- apresentou a intimina tipo θ/g2. Enquanto os 153 isolados de STEC pertenciam a 63 seropatótipos, somente 12 representaram 58% dos isolados. O seropatótipo ONT:H- stx2 (18 isolados) foi o mais comum, seguido pelo O171:H2 stx2 (12), etc. A maioria dos isolados (84%) de STEC pertenciam à serótipos encontrados previamente em seres humanos e cêrca de 56% à serótipos associados com STEC isolados de pacientes com a síndrome urémica hemolítica (HUS). Esses dados confirmam que o gado bovino é um importante reservatório de STEC patogênicos para humanos. Segundo nossa informação, este é o primeiro estudo que descreve a presença do gene saa em STEC dos serótipos O20:H19, O39:H49, O74:H28, O79:H19, O116:H21, O120:H19, O141:H7, O141:H8, O174:H21, e ONT:H21. Os serótipos O120:H19 e O185:H7 também não haviam sido descritos previamente em STEC de origem bovina.

En este estudio hemos caracterizado un total de 153 Escherichia coli productores de toxinas Shiga (STEC) aisladas de las heces de ganado bovino y de carne picada y hamburguesas de vacuno en Argentina. Los ensayos de PCR mostraron que 22 (14%) aislamientos llevaban el gen stx1, 113 (74%) presentaban el gen stx2 y que 18 (12%) tenían ambos genes. Los genes de virulencia para la intimina (eae), la enterohemolisina (ehxA) y la adhesina autoaglutinante de STEC (saa) fueron detectados en 36 (24%), 70 (46%) y 34 (22%) de los aislamientos, respectivamente. Ninguno de los 34 aislamientos saa-positivos llevaba el gen eae, pero 31 eran ehxA-positivos. Catorce aislamientos (7 del serotipo O26:H11 y 4 del serotipo O5:H-) tenían la intimina b1, 16 poseían la intimina g1 (11 del serotipo O145:H- y 5 del serotipo O157:H7), 5 aislamientos eran positivos para la intimina tipo ε1 (4 de los serotipos O103:H- y O103:H2), y un aislamiento O111:H- mostró la intimina tipo θ/g2. Aunque los 153 aislamientos de STEC pertenecían a 63 seropatotipos, sólo 12 constituían el 58% de los aislamientos. El seropatotipo ONT:H- stx2 (18 aislamientos) fue el más común, seguido por el O171:H2 stx2 (12 aislamientos), etc. La mayoría de los aislamientos (84%) de STEC pertenecían a serotipos encontrados previamente en seres humanos y el 56% a serotipos asociados con STEC aislados de pacientes con el síndrome urémico hemolítico (HUS). Por tanto, este estudio confirma que el ganado bovino es un importante reservorio de STEC patógenos para humanos. Según nuestra información, este es el primer estudio que describe la presencia del gen saa en STEC de los serotipos O20:H19, O39:H49, O74:H28, O79:H19, O116:H21, O120:H19, O141:H7, O141:H8, O174:H21, y ONT:H21. Los serotipos O120:H19 y O185:H7 tampoco habían sido descritos previamente en STEC de origen bovino.

Diferenciação das leptospiras patogênicas e não patogênicas por PCR Utilizou-se a reação em cadeia da polimerase (PCR) para identificar leptospiras patogênicas isoladas, na Argentina, de animais e do homem. Foram usados dois pares de primers (G1/G2; B64-I/B64-II), descritos anteriormente como apropriados para amplificar amostras pertencentes aos diferentes sorogrupos de Leptospira interrogans. Através deste método não se detectaram as leptospiras saprófitas (L. biflexa) isolados de água e solo. Este fato representa uma vantagem uma vez que possibilita a diferenciação de leptospiras patogênicas das não patogênicas em culturas. A sensibilidade da prova foi determinada, verificando-se que ela permitiu detectar 10 leptospiras por tubo de reação. Os tamanhos dos fragmentos amplificados foram de 285 ou 360 pares de bases (bp), dependendo da amostra patogênica estudada

A polymerase chain reaction was carried out to detect pathogenic leptospires isolated from animals and humans in Argentina. A double set of primers (G1/G2, B64-I/B64-II), described before, were used to amplify by PCR a DNA fragment from serogroups belonging to Leptospira interrogans but did not allow to detect saprophytic strains isolated from soil and water (L. biflexa). This fact represents an advantage since it makes possible the differentiation of pathogenic from non-pathogenic leptospires in cultures. The sensitivity of this assay has been determined, allowing to detect just only 10 leptospires in the reaction tube. Those sets of primers generated either a 285 bp or 360 bp fragment, depending on the pathogenic strain